業(yè)執(zhí)照.jpg)
三聚氰胺
快速檢測(cè)試劑盒說(shuō)明書
一、原理
本試劑盒采用間接競(jìng)爭(zhēng)ELISA方法，在微孔條上預(yù)包被偶聯(lián)抗原，樣本中的殘留物三聚氰胺將和微孔條上預(yù)包被的偶聯(lián)抗原競(jìng)爭(zhēng)抗三聚氰胺抗體，加入酶標(biāo)記物后，用TMB底物顯色，樣本吸光值與其所含殘留物三聚氰胺的含量成負(fù)相關(guān)，與標(biāo)準(zhǔn)曲線比較即可得出相應(yīng)殘留物三聚氰胺的含量。
二、試劑盒特性
生鮮乳、液態(tài)奶 ··································· 5 ppb
酸奶、奶粉 ········································ 10ppb
三聚氰胺 ········································· 100%
生鮮乳、液態(tài)奶 ··························· 90% ±25%
酸奶、奶粉 ································· 80% ±25%
三、試劑盒組成
1 | 微量測(cè)試孔 | 每條8孔，一板12條 | |
2 | 標(biāo)準(zhǔn)液×6瓶 （1ml/瓶） | 0ppb | 0.5ppb |
1.5ppb | 4.5ppb | ||
13.5ppb | 40.5ppb | ||
3 | 酶標(biāo)記物 | 7ml | 紅色帽 |
4 | 抗體工作液 | 7ml | 藍(lán)色帽 |
5 | 底物A液 | 7ml | 白色帽 |
6 | 底物B液 | 7ml | 黑色帽 |
7 | 終止液 | 7ml | 黃色帽 |
8 | 20X濃縮洗滌液 | 15ml | 白色帽 |
9 | 20X樣本提取液 | 50ml | 透明帽 |
10 | 5X樣品稀釋液 | 50ml | 藍(lán)色帽 |
四、所用儀器、試劑
具備的儀器：酶標(biāo)儀、振蕩器、離心機(jī)、刻度移液管、天平（感量0.01g）
微量移液器：?jiǎn)蔚?/span> 20µl～200µl、單道100µl～1000µl、多道 30～300 µl
五、樣本前處理步驟
（a）實(shí)驗(yàn)中必須使用一次性吸頭，吸取不同試劑時(shí)要更換吸頭。
（b）實(shí)驗(yàn)之前須檢查各種實(shí)驗(yàn)器具是否干凈，必要時(shí)可對(duì)實(shí)驗(yàn)器具進(jìn)行清潔，以避免污染干擾實(shí)驗(yàn)結(jié)果。
試劑1：樣本提取液
將20X樣本提取液與去離子水1:19稀釋備
用。
試劑2：樣品稀釋液
將5X樣品稀釋液與去離子水1:4稀釋備用。
（a）牛奶（純牛奶、生鮮乳等液體奶）樣本處理
樣本稀釋倍數(shù): 1倍
備注：較為粘稠的酸奶、煉乳制品無(wú)法使用此方法檢測(cè)。
（b）奶粉樣本處理
樣本稀釋倍數(shù): 10倍
（c）酸奶樣本處理
樣本稀釋倍數(shù): 5倍
六、 酶標(biāo)免疫分析程序:
七、結(jié)果判定
結(jié)果判定有兩種方法，粗略判定可用第1種方法，定量判定用第2種方法。注意樣本吸光度值與其所含三聚氰胺量成負(fù)相關(guān)。
1、粗略判定：
用樣本的平均吸光度值與標(biāo)準(zhǔn)值比較即可得出其濃度范圍(ng/ml)。假設(shè)樣本1的吸光度值為0.3，樣本2的吸光度值為1.0，標(biāo)準(zhǔn)液吸光度值分別是：0ppb為2.043； 0.5ppb為1.554；1.5ppb為1.015；4.5ppb為0.474；13.5ppb為0.151；40.5ppb為0.055。則樣本1的濃度范圍是4.5ppb～13.5ppb；樣本2的濃度范圍是1.5ppb～4.5ppb，乘以其對(duì)應(yīng)的稀釋倍數(shù)即為樣本中三聚氰胺實(shí)際濃度。
2、定量分析
（1）百分吸光率的計(jì)算，標(biāo)準(zhǔn)品或樣本的百分吸光率等于標(biāo)準(zhǔn)品或樣本的百分吸光度值的平均值（雙孔）除以第--個(gè)標(biāo)準(zhǔn)（0標(biāo)準(zhǔn)）的吸光度值，再乘以100%，即
百分吸光度值（%）＝ | B | ×100% |
B0 |
B—標(biāo)準(zhǔn)溶液或樣本溶液的平均吸光度值
B0—0ng/ml標(biāo)準(zhǔn)溶液的平均吸光度值
（2）標(biāo)準(zhǔn)曲線的繪制與計(jì)算
以標(biāo)準(zhǔn)品百分吸光率為縱坐標(biāo)，以三聚氰胺標(biāo)準(zhǔn)品濃度（ng/ml）的半對(duì)數(shù)為橫坐標(biāo)，繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線圖。將樣本的百分吸光率代入標(biāo)準(zhǔn)曲線中，從標(biāo)準(zhǔn)曲線上讀出樣本所對(duì)應(yīng)的濃度，乘以其對(duì)應(yīng)的稀釋倍數(shù)即為樣本中三聚氰胺實(shí)際濃度。
若利用試劑盒專業(yè)分析軟件進(jìn)行計(jì)算，更便于大量樣本的準(zhǔn)確、快速分析。
八、 注意事項(xiàng)
九、儲(chǔ)藏條件和保質(zhì)期
提示：酶標(biāo)板真空包裝袋若有漏氣，酶標(biāo)板仍然正常有效，不影響實(shí)驗(yàn)結(jié)果，請(qǐng)放心使用。
