DIGE技術實驗服務
實驗技術簡介:
DIGE一雙向熒光差異凝膠電泳(Two-dimensional fluorescence difference gel electrophoresis ,2D-DIGE)，是在傳統雙向電泳的基礎上發展而來的新型蛋白質組學定量技術，其分離蛋白質混合的原理與雙
向電泳是一致的， 主要利用蛋白質的等電點和分子量的差異來分離蛋白質混合物，同時應用熒光染料的靈敏度及內標的使用等技術，使其在定量蛋白質組學的研究中效果明顯優于傳統雙向電泳。DIGE使用的熒光染料有Cy2, Cy3和Cy5,它們能與蛋白質的賴氨酸側鏈氨基反應而使蛋白質被標記，被標記蛋白質的等電點和分子量幾乎不受影響，等量混合標記好的蛋白質后進行雙向電泳，不同凝膠之間可以
通過cy2內標匹配，消除凝膠之間的差異，蛋白質表達量的變化則通過cy3和cy5不同熒光的強度來體現。
與常規雙向電泳后，銀染或考染膠相比，DIGE具有以下優勢:
1、靈敏度高，低可檢測到125pg的蛋白質;
2、高效性，同一塊凝膠上可以電泳兩個樣品，減輕了工作量;
3、線性范圍更廣，動態范圍高達10-5;
4、定量精確,采用內標消除了凝膠與凝膠之間的實驗誤差，顯著提高了實驗的精確度和可重復性;
5、統計學分析，ImageMaster7.0 (DIGE) 軟件可以得到統計學可信的結果，降低了操作者之間的偏差。
DIGE技術服務流程
DIGE技術服務內容
1、樣本制備與定量; .
2、熒光標記;
3、雙向電泳和圖片分析;
4、DIGE實驗報告提交。
送樣須知:
1、技術咨詢:在您開展實驗之前，本公司將為您竭誠提供有效的DIGE實驗設計方案。
2、為了保證DIGE實驗能順利進行，樣品須液氮或干冰保存寄送，
注:樣本應避免各類污染和反復凍融。
實驗報告內:
1、DIGE熒光電子圖片;
2、蛋白質點定量分析結果，包括差異點號碼、差異倍數、pI和MW等;
3、完整實驗報告，包括實驗步驟、使用儀器、軟件檢索參數等。
實驗代做服務：
ELISA試劑盒免費代檢測 | CCK8檢測 | 基因組DNA提取
| 蛋白相互作用分析 |
Western Blot
| 免疫組化 | 熒光定量PCR | 動物模型服務 |
流式細胞檢測 | 細胞增殖 | 激光共聚焦 | DNA甲基化實驗 |
細胞劃痕 | 鈣離子濃度檢測 | 掃描電鏡實驗 | microRNA 測序 |
動物實驗 | Taqman探針 | ATP/ADP檢測
| 石蠟/冰凍切片 |
定點突變 | 線粒體膜電位(MMP)檢測 | 細胞生長曲線的測定 | 藥理毒理動物實驗
|
免疫共沉淀 | 真核表達載體構建 | 染色質免疫沉淀CHIP | 非標定量（Label-free）實驗 |
