| 更新時間： | 2025-01-02 |
| 型 號： | |
| 所屬分類： | 蛋白質(zhì)組學(xué)實驗 |
| 報 價： | 500 |
提供商: 上海研謹(jǐn)生物服務(wù)名稱: 平行反應(yīng)監(jiān)測技術(shù)（PRM） 實驗服務(wù)服務(wù)： 1-2周規(guī)格: 實驗服務(wù) 價格： 500元收費標(biāo)準(zhǔn)/服務(wù)周期/提供結(jié)果:歡迎咨詢詳談，我們會根據(jù)您的方案及需求制定詳細(xì)的服務(wù)協(xié)議。更多實驗技術(shù)服務(wù)請瀏覽網(wǎng)站其他內(nèi)容,或來電詳詢!
平行反應(yīng)監(jiān)測技術(shù)(PRM) :
PRM是一種基于高分辨、高精度質(zhì)譜的離子監(jiān)視技術(shù)，能夠?qū)δ繕?biāo)蛋白質(zhì)、目標(biāo)肽段(如發(fā)生翻譯后修飾的肽段)進(jìn)行選擇性檢測，從而實現(xiàn)對目標(biāo)蛋白質(zhì)/肽段進(jìn)行定量。PRM技術(shù)基于Q-Orbitrap為代表的高分辨、高精度質(zhì)譜平臺，首先
利用四級桿質(zhì)量分析器的選擇能力，用Q1選擇目標(biāo)肽段的母離子,隨后在Collision cell中對母離子進(jìn)行碎裂，后利用Orbitrap分析器在二級質(zhì)譜中檢測所選擇的母離子窗口內(nèi)的所有碎片信息。這樣即可對復(fù)雜樣本中的目標(biāo)蛋白質(zhì)/肽段進(jìn)行準(zhǔn)確地特異性分析。
實驗意義:
PRM技術(shù)是針對無抗體蛋白的驗證新技術(shù)，用于label free, iTRAQ, TMT, SILAC等相對定量蛋白質(zhì)組數(shù)據(jù)的驗證，或?qū)?fù)雜樣本中的目標(biāo)蛋白質(zhì)進(jìn)行靶向定量分析。
實驗步驟:
用PRM進(jìn)行蛋白質(zhì)組數(shù)據(jù)驗證的一般步驟為:
結(jié)果展示
實驗完成周期及交付標(biāo)準(zhǔn):
1.實驗周期: --般PRM時間為: 5-10天
2.交付標(biāo)準(zhǔn):
組學(xué)驗證:
①主要儀器、試劑和實驗方法。
②PRM目標(biāo)離子信息:肽段序列和定量子離子。
③方法學(xué)重復(fù)性評價:三次技術(shù)重復(fù)的色譜峰面積相對標(biāo)準(zhǔn)偏差(RSD) (預(yù)實驗結(jié)果) 。
④實驗結(jié)果:二級圖譜，XIC圖譜,原始峰面積強度值，矯正后的相對表達(dá)量，兩組樣本間的相對比值，ttest p值。
相對/定量:
①主要儀器、試劑和實驗方法。
②PRM目標(biāo)離子信息:肽段序列和定量子離子。
③方法學(xué)評價:相對定量的重復(fù)性評價-測試樣本的三次技術(shù)重復(fù)的色譜峰面積相對標(biāo)準(zhǔn)偏差(RSD) (預(yù)實驗結(jié)果) ;
定量的方法學(xué)評價-標(biāo)準(zhǔn)品XIC圖譜，LOD， LOQ,線性范圍， 6個稀釋梯度得到的標(biāo)準(zhǔn)曲線及線性公式(每個稀釋度有3次技術(shù)重復(fù))。
④實驗結(jié)果:
相對定量:二級圖譜，XIC圖譜,原始峰面積強度值，矯正后的相對表達(dá)量，兩組樣本間的相對比值，ttest p值。
定量:二級圖譜，XIC圖譜,原始峰面積強度值，根據(jù)標(biāo)準(zhǔn)曲線計算得到的蛋白質(zhì)濃度值，兩組樣本間的相對比值，ttest p值。
需確認(rèn)的信息:
1.樣品:
①如果樣品為蛋白質(zhì)溶液，蛋白質(zhì)總量≥300mg;
②如果是組織樣品，樣品總量≥0.1g;如果是細(xì)胞樣品，細(xì)胞數(shù)量≥107個;
③如果是體液樣品，血清≥200ml，腦脊液≥200ml, 尿液≥1ml,淚液≥1ml。
2.樣品采集過程中使用到塑料制品時，盡量使用無色進(jìn)口產(chǎn)品，以減少塑料制品中雜質(zhì)對質(zhì)譜檢測的影響。
文獻(xiàn)參考
[1] Navin Rauniyar. Parallel Reaction Monitoring: A Targeted Experiment Performed Using High Resolution and HighMass Accuracy Mass Spectrometry. IntJ Mol Sci. 2015 Dec; 16(12): 28566- -28581.
實驗代做服務(wù)：
ELISA試劑盒免費代檢測 | CCK8檢測 | 基因組DNA提取
| 蛋白相互作用分析 |
Western Blot
| 免疫組化 | 熒光定量PCR | 動物模型服務(wù) |
流式細(xì)胞檢測 | 細(xì)胞增殖 | 激光共聚焦 | DNA甲基化實驗 |
細(xì)胞劃痕 | 鈣離子濃度檢測 | 掃描電鏡實驗 | microRNA 測序 |
動物實驗 | Taqman探針 | ATP/ADP檢測
| 石蠟/冰凍切片 |
定點突變 | 線粒體膜電位(MMP)檢測 | 細(xì)胞生長曲線的測定 | 藥理毒理動物實驗
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免疫共沉淀 | 真核表達(dá)載體構(gòu)建 | 染色質(zhì)免疫沉淀CHIP | 非標(biāo)定量（Label-free）實驗 |
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