神經元尼氏染色實驗服務
實驗技術簡介:
Franna Nissl (1860-1919) 1892年創(chuàng)立了Nissl染色法，以發(fā)現Nissl小體和Niss變性而聞名。常用的堿性染料有CresyI violet (焦油紫，甲.酚紫，克紫) ; thionine (硫堇); tolridine blue (甲苯胺藍)等。尼氏體為嗜堿性物質，又稱嗜染質，光鏡下呈斑塊狀或細粒狀散在均勻分布。在一些大型的運動神經元,尼氏體大而多，宛如虎皮花紋，又稱“虎斑"。電鏡下，尼氏體由大量平行排列的粗面內質網和其間的游離核糖體組成。尼氏體是神經元胞體細胞質的特征性結構之一，神經元胞質另外一 特征性結構為神經原纖維。
實驗技術原理:
正常的神經細胞都含有一定數量的尼氏體， 它們主要分布于神經細胞的漿中，形狀有大有小，如三角形，有的為橢圓形。這些物質能被大部分的藍色染料所染色，這些染料如焦油堅牢紫(Cresyl fast violet)亞甲藍(methylene blue)甲苯胺藍(toluidine blue)硫董(thionin) 等鈄其染為藍色。但是，當神經細胞受傷后，胞質內的尼氏體更可發(fā)生變化，嚴重的可消失。
實驗操作流程:
1、切片脫蠟至水
2、用焦油堅牢紫水溶液浸染20-30分鐘
3、水洗
4、用95%酒精分化
5、*脫水，二甲苯透明，中性樹膠
實驗結果:
神經細胞單位:紫-藍色細胞核:紫藍色尼氏體:紫深藍色
實驗操作流程:
1、切片脫蠟至水
2、用焦油堅牢紫水溶液浸染20-30分鐘
3、水洗
4、用95%酒精分化
5、*脫水，二甲苯透明，中性樹膠
實驗注意事項:
客戶提供:
1、組織樣品:新鮮組織放入液氮或-80度保存,組織不少于100mg;
2、培養(yǎng)細胞:通過細胞計數取不少于2x106個細胞于EP管，加入0 .5ml生理鹽水或蛋白保護劑，混溝后保存于冰箱(-80°C, 避免反復凍融) ;
3、血液細胞標本:以抗凝管保存血樣或以淋巴細胞分離液分離細胞后加入0.5m生理鹽水或蛋白保護劑,保存(-80°C可長期保存,避免反復凍融) ;
4、血清或細胞培養(yǎng)液標本:離心去掉雜質后取上清入EP管，保存(49C可保存15-20天，-80°C可長期保存，避免反復凍融) ;
5、石蠟切片，冰凍切片以及細胞爬片，涂片等。
6、樣本運輸:可選擇以下任何-種方式寄送標本
組織樣本、細胞樣本以干冰運輸或加入蛋白保護劑后，加冰袋寄送;
細胞樣本也可直接寄送培養(yǎng)瓶(密封保證不污染、培養(yǎng)液不漏出) ;
血清或上清液直接加冰袋寄送(送視路程遠近2 -3天可到達)。
交付標準:
1、圖片;
2、完整項目報告(材料、試劑、儀器、方法、數據分析、實驗結果)。
其他:
1、應用酒精分化切片，要迅速，防止過度分化，將切片上的顏色全部脫掉。
實驗代做服務：
ELISA試劑盒免費代檢測 | CCK8檢測 | 基因組DNA提取
| 蛋白相互作用分析 |
Western Blot
| 免疫組化 | 熒光定量PCR | 動物模型服務 |
流式細胞檢測 | 細胞增殖 | 激光共聚焦 | DNA甲基化實驗 |
細胞劃痕 | 鈣離子濃度檢測 | 掃描電鏡實驗 | microRNA 測序 |
動物實驗 | Taqman探針 | ATP/ADP檢測
| 石蠟/冰凍切片 |
定點突變 | 線粒體膜電位(MMP)檢測 | 細胞生長曲線的測定 | 藥理毒理動物實驗
|
免疫共沉淀 | 真核表達載體構建 | 染色質免疫沉淀CHIP | 非標定量（Label-free）實驗 |
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